MDCK NBL-2 (犬腎細胞)

MDCK NBL-2 (犬腎細胞)

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗，不做其他科學(xué)實(shí)驗外的使用！

商品詳情：

別稱(chēng) MDCK (NBL-2); NBL-2; Madin-Darby Canine Kidney; Madin Darby Canine Kidney

種屬 家犬

年齡（性別） 雌性，成年

組織來(lái)源 腎

生長(cháng)特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

背景描述：MDCK(NBL-2)細胞是由S·H·Madin和N·B·Darby在1958年9月從一只外觀(guān)正常的成年雌性英國小獵犬的腎分離得到的；MDCK(NBL-2)細胞角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色呈陽(yáng)性；MDCK(NBL-2)細胞被用于研究β-粥樣蛋白前體的處理及其蛋白水解產(chǎn)物。

生物安全等級 1

生長(cháng)培養基 MEM（ATCC改良)＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

基因表達情況 The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.

細胞培養操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養基，培養過(guò)夜）。第三天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 -3min（視細胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。

c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。

3) 細胞凍存：待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細胞及細胞培養液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細胞計數。

b、根據細胞數量加入無(wú)血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠胞漿型0脂酶A2(cPLA2)檢測試劑盒 ，英文名： cPLA2 ELISA Kit

Mouse beta amyloid (A beta 1-42 1-42) ELISA Kit 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)檢測試劑盒

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CLIAKitforITF(HumanIestinalefoilfactor)ELISAKit人腸三葉因子

通用型丁酰酯酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

AIL-R3大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體3

CA14重組人 Carbonic Anhydrase XIV / CA14 蛋白 Protein

血管緊張素Ⅱ受體2(AGTR2)重組蛋白 Recombinant Angiotensin II Receptor 2 (AGTR2)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

GP1BB Protein Human 重組人 GP1BB / CD42c 蛋白

Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標簽)

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HA重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

MDCK NBL-2 (犬腎細胞)小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human P-selectin (omein) ELISA Kit 人網(wǎng)膜素(omein)檢測試劑盒

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HumanCathepsinK,cath-K檢測試劑盒人組織蛋白酶K(cath-K)檢測試劑盒規格：96T/48T

轉基因油菜(canola)RF3品系試劑盒20次

Humansignalrecognizationpaicleaibody,SRPELISAKit人抗信號識別顆?？贵w(SRP)檢測試劑盒規格：96T/48T

兔子白介素9(IL-9)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

細胞培養注意事項 ：

一、 收到細胞后首先觀(guān)察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象 發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

二、仔細閱讀細胞說(shuō)明書(shū)，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問(wèn)題，責任由 客戶(hù)自行承擔。

三、用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細胞狀態(tài)。因運輸問(wèn)題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F象。觀(guān)察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。

四、貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養基重懸 細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進(jìn)行培養。

五、 請客戶(hù)用相同條件的培養基用于細胞培養。

六、 建議客戶(hù)收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸的原因，個(gè)別敏感細胞會(huì )出現不穩定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪(fǎng)直至問(wèn)題解決。

七、該細胞僅供科研使用。

八、備注：運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培 養條件新配制的培養基來(lái)培養細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。