UMNSAH/DF-1 (雞胚成纖維細胞)

細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。

UMNSAH/DF-1 (雞胚成纖維細胞)

商品屬性

商品介紹

別稱(chēng) UMNSAH-DF-1; UMNSAH-DF 1; UMNSAH-DF1; UMNSAH/DF#1; DF-1; DF1; Douglas Foster-1

種屬 家雞

年齡（性別） 10日齡

組織來(lái)源 胚胎，自發(fā)永生化

生長(cháng)特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

參考資料(來(lái)源文獻)

生物安全等級 1

生長(cháng)培養基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~22-36小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：39℃（Max.40℃，Min.38℃）

致瘤性 No, in immunosuppressed mice. No, in semisolid medium.

注意事項 1、該細胞培養難度較高，溫度波動(dòng)會(huì )導致細胞空泡增多； 2、該細胞為38℃~40℃培養，最佳培養溫度為39℃，37℃培養會(huì )影響細胞狀態(tài)，建議提前準備專(zhuān)用培養箱； 3、受溫度波動(dòng)影響，收貨常見(jiàn)細胞空泡較多，穩定培養后可恢復。

細胞傳代培養操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長(cháng)密度達到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養瓶放入37℃培養箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀(guān)察細胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。

（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養瓶中，補充培養液并搖勻，放置37℃的CO2培養箱進(jìn)行培養。

（8）根據細胞生長(cháng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠三0酸肌醇(IP3)檢測試劑盒 ，英文名： IP3 ELISA Kit

Mouse androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 小鼠雄(ASD)檢測試劑盒

RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHA(Humanhemagglinin)ELISAKit人血凝素

細胞半胱蛋白酶-9(CASPASE-9)活性熒光定量檢測試劑盒20次

RatVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit大鼠血管內皮細胞生長(cháng)因子(VEGF)檢測試劑盒規格：96T/48T

SFRP4重組小鼠 sFRP4 蛋白 Protein

CIDEB peptide CIDEB抗原 0.5mgCIDEB peptide CIDEB抗原

AKR1B1重組人 AKR1B1 蛋白 Protein

HOXA1 Protein Human 重組人 HOXA1 蛋白

SERPINF2 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinF2 蛋白

CIDEB peptide CIDEB抗原 0.5mgCIDEB peptide CIDEB抗原

HOXA1 Protein Human 重組人 HOXA1 蛋白

SFRP4重組小鼠 sFRP4 蛋白 Protein

SERPINF2 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinF2 蛋白

AKR1B1重組人 AKR1B1 蛋白 Protein

UMNSAH/DF-1 (雞胚成纖維細胞)小鼠FMS樣酪酸激酶3(Flt3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat vitamin A (VA) ELISA Kit 大鼠A(VA)檢測試劑盒

HumanGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 人生長(cháng)激素釋放多肽(GHRP)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCollectin檢測試劑盒人膠原凝集素(Collectin)檢測試劑盒規格：96T/48T

組織Akt1/PKBa激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

HumaeceptorⅡfoheFcregionofimmunoglobulinE,FcεRⅡELISAKitEFc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)檢測試劑盒規格：96T/48T

兔交聯(lián)物(PY)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒  組裝/原裝

兔白細胞介素-35（IL-35）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔白細胞介素-35（IL-35）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝