大鼠腎足突細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)

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大鼠腎足突細胞培養試劑盒【Rat kidney PrimaCell: Normal Renal Podocytes】
  大鼠腎足突細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)腎是脊椎動(dòng)物的一種器官，屬于泌尿系統的一部分，負責過(guò)濾血液中的雜質(zhì)、維持體液和電解質(zhì)的平衡，后產(chǎn)生尿液經(jīng)由后續管道排出體外；同時(shí)也具備內分泌的功能以調節血壓。在人體中，正常成人具備兩枚腎臟，位于腰部?jì)蓚群蠓?。其中，大鼠腎足突細胞傳5代以上仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。 雖然腎足突組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的腎足突組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的薄的腎足突組織片能使得腎足突組織中細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將腎足突細胞分離開(kāi)來(lái)。

本試劑盒適用于分離培養大鼠腎足突細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的腎足突原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠腎足突細胞培養試劑盒適合于培養大鼠的腎足突細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠腎足突細胞組織解離液(3×ml) （2）大鼠腎足突細胞組織處理緩沖液(00ml) （3）FibrOutTM大鼠腎足突細胞成纖維抑制劑 (ml（500x）) （4）大鼠腎足突細胞組織洗液(5 x 00 ml) （5）大鼠腎足突細胞生長(cháng)因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠腎足突細胞基礎培養基(5 x 00ml) （7大鼠腎足突組織預備液 ( x 00 ml) （8）大鼠腎足突細胞培養試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

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注意事項：
. 接收到大鼠腎足突細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)，肉眼觀(guān)察細胞培養基顏色，顯微鏡觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議收到時(shí)的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴格無(wú)菌操作，打開(kāi)細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶?jì)鹊呐囵B基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀(guān)察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。

培養步驟：
大鼠腎足突細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

AFP / alpha-fetoprotein 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM    25 Test

CD77 / PRV- / PRV 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

GCSH 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   IHC-P    50 µg

CQBP / HABP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IP    50 µg

SCGN / Secretagogin 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L 抗體, 兔單抗 WB   IF   IP  ICC/IF    50 µg

BCL2 / Bcl-2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µL

CD0 / Neprilysin / MME 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD2 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

ICOS Ligand / B7-H2 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM    25 Test

大鼠腎足突細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)硫酸鉻鉀分子式：499.4英文名稱(chēng)：Potassium chromium sulfate：7788-99-0分子量： CrKO8S2.2H2O

,3,5-三異丙分子式：204.35英文名稱(chēng)：,3,5- three ISO：77-74-8分子量： C5H24

2-溴---4-硝分子式：327.9英文名稱(chēng)：2- -- -4-：749-4-6分子量： C6H3BrINO2

六羰鉬分子式：264英文名稱(chēng)：Six carbonyl molybdenum：3939-06-5分子量： C6MoO6

4-氯-7-硝-2,,3-并氧雜惡二唑(NBD-Cl)英文名稱(chēng)：4-, -7-, -2,,3-,, NBD-Cl, and oxygen, two分子式：99.55分子量： C6H2CLN3O3：099-89-0

(2B油）鄰氯對甲分子式：4.6英文名稱(chēng)：(2B) ortho chlorine to amino toluene：95-74-9分子量： C7H8ClN； ClC6H3(CH3)NH2

-甲-5-乙氧羰吡唑分子式：英文名稱(chēng)：- methyl -5- ethyl：97079-26-8分子量： C7H0N2O2

二脲分子式：242.28英文名稱(chēng)：Two phenyl urea：40-22-7分子量： C3H4N4O； C6H5NHNHCONH

丙酸鉀分子式：2.7英文名稱(chēng)：Potassium propionate：327-62-8分子量： C3H5KO2

人參皂苷Rb3英文名稱(chēng)：Ginsenoside Rb3分子式：079.2685分子量：C53H90O22：68406-26-8