大鼠腎上皮細胞培養試劑盒培養

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大鼠腎上皮細胞培養試劑盒【Rat Kidney PrimaCell5: Normal Renal Artery Endothelial Cells】
     大鼠腎上皮細胞培養試劑盒培養腎是脊椎動(dòng)物的一種器官，屬于泌尿系統的一部分，負責過(guò)濾血液中的雜質(zhì)、維持體液和電解質(zhì)的平衡，后產(chǎn)生尿液經(jīng)由后續管道排出體外；同時(shí)也具備內分泌的功能以調節血壓。在人體中，正常成人具備兩枚腎臟，位于腰部?jì)蓚群蠓?。其中，大鼠腎上皮細胞分離自正常大鼠腎組織，腎上皮細胞主要功能：（）腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸，并排泌非營(yíng)養物質(zhì)進(jìn)入終尿。（2）細胞能分泌炎癥介質(zhì)如細胞因子和趨化因子，通過(guò)產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應。（3）是許多先天性疾病、代謝性疾病和炎癥的主要損傷部位。（4）在移植腎炎癥和新月體腎炎中上皮細胞表達IL-2R alpha和MHC-Ⅱ類(lèi)抗原，參與腎免疫損傷的發(fā)生。大鼠腎上皮細胞傳5代以上仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。 雖然大鼠腎上皮組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的腎上皮組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的薄的腎上皮組織片能使腎上皮細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將腎上皮細胞分離開(kāi)來(lái)。

本試劑盒適用于分離培養大鼠腎上皮細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的腎上皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠腎上皮細胞培養試劑盒適合于培養大鼠的腎上皮細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠腎上皮細胞組織解離液(3×ml) （2）大鼠腎上皮細胞組織處理緩沖液(00ml) （3）FibrOutTM大鼠腎上皮細胞成纖維抑制劑 (ml（500x）) （4）大鼠腎上皮組織洗液(5 x 00 ml) （5）大鼠腎上皮細胞生長(cháng)因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠腎上皮細胞基礎培養基(5 x 00ml) （7）大鼠腎上皮組織預備液 ( x 00 ml) （8）大鼠腎上皮細胞培養試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
培養步驟：
大鼠腎上皮細胞培養試劑盒培養對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

CD66 / ALCAM 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD55 / DAF 抗體 (PerCP), 兔單抗 FCM    25 Test

VASN / Vasorin 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Dkk3 / REIC 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

CEACAM6 / CD66c 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM    25 Test

PLAUR / CD87 抗體, 鼠單抗 FCM    50 µg

CD3 / Nectin-3 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

Arylsulfatase A / ARSA 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

IL-2 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

GPA33 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

大鼠腎上皮細胞培養試劑盒培養絡(luò )塞維英文名稱(chēng)：Luo Seville分子式：428.43032分子量：C20H28O0：84954-92-7

2-氯-4-吡分子式：239.44英文名稱(chēng)：2- chloride -4-：53034-86-7分子量： C5H3ClIN

,5-二羥異喹啉分子式：6.6英文名稱(chēng)：,5- two hydroxy ISO：88540分子量： C9H7NO2

五氘代氯分子式：7.6英文名稱(chēng)：Five deuterium substituted：34-55-4分子量： C6ClD5

刺五加苷D英文名稱(chēng)：Thorn D分子式：742.72分子量：C34H46O8：79484-75-6

叔戊分子式：48.24英文名稱(chēng)：Tert amylbenzene：2049-95-8分子量： CH6

,2,4-*氧分子式：68.9英文名稱(chēng)：,2,4- grade three：35-77-3分子量： C9H2O3

,3-二氯-2-丙英文名稱(chēng)：,3- two -2-分子式：28.98分子量： C3H6Cl2O：96-23-

2-氯-3-硝吡分子式：58.54英文名稱(chēng)：2- -3- nitro pyridine：5470-8-8分子量： C5H3ClN2O2

-溴-3,5-二甲氧分子式：27.06英文名稱(chēng)：- two -3,5-：20469-65-2分子量： C8H9BrO2

注意事項：
. 接收到大鼠腎上皮細胞培養試劑盒培養，肉眼觀(guān)察細胞培養基顏色，顯微鏡觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議收到時(shí)的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴格無(wú)菌操作，打開(kāi)細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶?jì)鹊呐囵B基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀(guān)察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。