大鼠食管平滑肌細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)

大鼠食管平滑肌細胞培養試劑盒【Rat Esophagus PrimaCell: Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】
  大鼠食管平滑肌細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)食管是咽和胃之間的消化管。食管在系統發(fā)生上起初很短，隨著(zhù)頸部的伸長(cháng)和心肺的下降，而逐漸增長(cháng)。。其中，食管平滑肌細胞是食管運動(dòng)細胞，食團吞咽后由咽腔進(jìn)入食管上端，食管肌肉即發(fā)生波形蠕動(dòng)，使食團沿食管下行至胃。大鼠食管平滑肌細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。 雖然食管平滑肌組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的食管平滑肌組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的食管平滑肌能使得平滑肌組織中平滑肌細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將食管平滑肌細胞細胞分離開(kāi)來(lái)。

本試劑盒適用于分離培養大鼠食管平滑肌細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的食管平滑肌原代細胞中成纖維細胞的含量。

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注意事項：
. 接收到大鼠食管平滑肌細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)，肉眼觀(guān)察細胞培養基顏色，顯微鏡觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議收到時(shí)的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴格無(wú)菌操作，打開(kāi)細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶?jì)鹊呐囵B基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀(guān)察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。

培養步驟：
大鼠食管平滑肌細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

CD20 / MS4A 抗體 (PerCP), 兔單抗 FCM    25 Test

IL8R / CD28a 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

ACAN 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 µg

ILRL 抗體, 兔多抗 ELISA   WB    400 µg

CD5 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 µg

IFNAR2 / IFNABR 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Endoglin / CD05 / ENG 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD47 / EMMPRIN / Basigin 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM   IF   ICC/IF   25 Test

CD20 / MS4A 抗體 (APC), 兔單抗 FCM    25 Test

CALCA / CGRP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

大鼠食管平滑肌細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)4--2-氯嘧分子式：29.55英文名稱(chēng)：4- amino -2-：746-50-9分子量： C4H4ClN3

知母皂苷A-Ⅲ英文名稱(chēng)：Timosaponin A- III分子式：740.92分子量： C39H64O3：4059-79-4

菝葜皂苷元英文名稱(chēng)：Sarsasapogenin分子式：46.64分子量： C27H44O3：26-9-2

乙丙酯英文名稱(chēng)：Acetic acid acrylic ester分子式：分子量：：

檳榔堿英文名稱(chēng)：Arecoline分子式：236.分子量：C8H4BrNO2：300-08-3

4-(2-代乙酰)-2,2,6,6-四甲--氧自由分子式：339.2英文名稱(chēng)：4- (2- iodobenzofuran carbamoylmethyl) -2,2,6,6- four -- methyl piperidine oxygen radicals：2573-24-0分子量： CH20IN2O2

分子式：246.74英文名稱(chēng)：Hydrochloric acid naphthalene：550-99-2分子量： C4H5ClN2

2,5-二氯-3-硝吡分子式：92.98英文名稱(chēng)：2,5- two -3- nitro pyridine：2427-62-3分子量： C5H2Cl2N2O2

氯-乙酯甲-3-甲咪唑分子式：204.65英文名稱(chēng)：Chlorinated - ethyl methyl -3-：分子量： C8H3ClN2O2

2-氯吡分子式：3.55英文名稱(chēng)：2- chloride：09-09-分子量： C5H4ClN