小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)

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小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養試劑盒【Mouse EyePrimaCell: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells】
     小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò )膜和光感受器細胞外節之間，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò )膜血管之間的離子、水、營(yíng)養物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉運通道。其中，視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長(cháng)因子，幫助維持脈絡(luò )膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞傳5代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。 利用本公司試劑盒中提供的視網(wǎng)膜組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的視網(wǎng)膜組織能使得視網(wǎng)膜組織中色素上皮細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將色素上皮細胞分離開(kāi)來(lái)。。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的上皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養試劑盒適合于培養小鼠的視網(wǎng)膜色素上皮細胞。

本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞成纖維抑制劑（ml（500X）） （4）小鼠視網(wǎng)膜色素上皮組織洗液（5 x 00 ml） （5）小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞生長(cháng)因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞基礎培養基（5 x 00ml） （7）小鼠視網(wǎng)膜色素上皮組織預備液（ x 00 ml） （8）小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
培養步驟：
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

人腦靜脈血管平滑肌細胞*培養基00mL

佛羅里達側耳 Pleurotus florida

小鼠垂體瘤細胞英文名稱(chēng)：

熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

運動(dòng)發(fā)酵單胞菌 Zymomonas mobilis

His標簽蛋白裂解液20 ug

中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis

香菇 Lentinula edodes

人胰腺氟耐藥英文名稱(chēng)：

人腺上皮細胞*培養基00mL

小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)7-氟-2-甲喹啉分子式：6.8英文名稱(chēng)：7- -2- methyl group：28-74-分子量： C0H8FN

鹽酸吖分子式：5.56英文名稱(chēng)：Acridine hydrochloride：7784-47-3分子量： C3H9N·HCl

5-溴-2-甲-3-硝吡分子式：27.02英文名稱(chēng)：5- -2- -3- nitro pyridine：9434-05-4分子量： C6H5BrN2O2

2-溴-3-氯-5-三氟甲吡分子式：260.44英文名稱(chēng)：2- -3- three f：75806-84-7分子量： C6H2BrClF3N

聚乙英文名稱(chēng)：PE分子式：分子量： [C2H4]n：9002-88-4

糖精鈉英文名稱(chēng)：Saccharin sodium分子式：205.7分子量： C7H4NNaO3S·xH2O：82385-42-0

3-氯--丙英文名稱(chēng)：3- --分子式：94.54分子量： C3H7ClO：627-30-5

小白菊內酯英文名稱(chēng)：White Chrysanthemum分子式：248.32分子量：C5H20O3：20554-84-

2-溴嘧分子式：58.98英文名稱(chēng)：2- bromide：4595-60-2分子量： C4H3BrN2

4,4'-二甲聯(lián)甲酰分子式：英文名稱(chēng)：4,4'- two methyl group：分子量：

注意事項：
. 接收到小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養試劑盒說(shuō)明書(shū)，肉眼觀(guān)察細胞培養基顏色，顯微鏡觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議收到時(shí)的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴格無(wú)菌操作，打開(kāi)細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶?jì)鹊呐囵B基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀(guān)察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。