MCF 7B (人乳腺癌細胞)

細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。

MCF 7B (人乳腺癌細胞)

商品屬性

商品介紹

別稱(chēng) MCF-7B

年齡（性別） 69歲

生長(cháng)特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

背景描述：MCF 7B細胞為MCF-7細胞的一個(gè)亞克隆，表達高水平的褪黑素MT1受體mRNA；MCF 7B細胞為MCF-7細胞的一個(gè)亞克隆，表達高水平的褪黑素MT1受體mRNA；MCF 7B細胞對褪黑素有一定的敏感性。

生長(cháng)培養基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細胞傳代培養操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長(cháng)密度達到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養瓶放入37℃培養箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀(guān)察細胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。

（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養瓶中，補充培養液并搖勻，放置37℃的CO2培養箱進(jìn)行培養。

（8）根據細胞生長(cháng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠蛋白激酶C(PKC)檢測試劑盒 ，英文名： PKC ELISA Kit

Pig angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 豬血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)檢測試劑盒

病毒H7亞型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) 48T

CLIAKitforLp-PL-A2(Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2)ELISAKit小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2

通用石蠟切片HRP酶聯(lián)檢測封閉溶液10毫升

ELISAKitHSVⅡ-Ab雞單皰疹病毒Ⅱ型抗體

BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein

CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽

STAT6重組人 STAT6 蛋白 Protein

CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 標簽)

CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白

CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽

CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 標簽)

BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein

CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白

STAT6重組人 STAT6 蛋白 Protein

MCF 7B (人乳腺癌細胞)小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human lymphotoxin alpha (LTA) ELISA Kit 人淋巴毒素α(LTA)檢測試劑盒

Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISAKit 人6-羥多巴胺(6-OHDA)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Chickenglialfibrillaryacidicprotein,GFAP檢測試劑盒雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)檢測試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞CASPASE-6蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

Mousehepaticlipase,HLELISAKit小鼠肝脂酶(HL)檢測試劑盒規格：96T/48T

小鼠血管內皮生長(cháng)因子受體 -1(mouse VEGF-R1)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 R&D

小鼠血管內皮生長(cháng)因子受體 2(mouse VEGF-R2)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 R&D

大鼠Active Caspase-3   作用：   ELISA   規格：      進(jìn)口分裝

大鼠Active Caspase-7   作用：   ELISA   規格：      進(jìn)口分裝