大鼠腦靜脈血管組織提取物培養

公司向您大鼠腦靜脈血管組織提取物培養的詳細說(shuō)明：了解更多原代組織提取物點(diǎn)擊進(jìn)

大鼠腦靜脈血管組織提取物【Brain: Normal Rat Cerebral Venous Vascular Derivatives】
     大鼠腦靜脈血管組織提取物培養腦組織是指包容在顱腔內的三大塊神經(jīng)纖維組織：大腦、腦干和小腦。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍大鼠腦靜脈血管組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準備的*條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。        cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA*鏈，以50ul總反應體系進(jìn)行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應0min 后終止RT反應。利用x RT Buffer 運輸cDNA， μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴格的QA/QC分析，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。        蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。        潛在的應用： <>已知基因的PCR克??；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達圖譜。
培養步驟：
大鼠腦靜脈血管組織提取物培養對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

兔抗EFNB3多克隆抗體 英文名：Anti-EFNB3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗ARHGIB多克隆抗體 英文名：Anti-ARHGIB rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗TAF多克隆抗體 英文名：Anti-TAF rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗KLHL4多克隆抗體 英文名：Anti-KLHL4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗MT-N5多克隆抗體 英文名：Anti-MT-N5 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗PROK多克隆抗體 英文名：Anti-PROK rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗PTOV多克隆抗體 英文名：Anti-PTOV rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗TGFB多克隆抗體 英文名：Anti-TGFB rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗TGFB多克隆抗體 英文名：Anti-TGFB rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗SLC2A3多克隆抗體 英文名：Anti-SLC2A3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗HOXB9多克隆抗體 英文名：Anti-HOXB9 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗HOXB7多克隆抗體 英文名：Anti-HOXB7 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

大鼠腦靜脈血管組織提取物培養3-叔丁基-4-羥基茴香醚標準品　　　英文名稱(chēng)3-tert-Butyl-4-hydroxyanisole　　　規格?。?00mg　　CAS:2-00-6　　進(jìn)口、國產(chǎn)

甲基叔丁基醚標準品　　　英文名稱(chēng)tert-Butylmethyl ether　　　規格?。?2ml×3ampules　　CAS:634-04-4　　進(jìn)口、國產(chǎn)

羥苯丁酯標準品　　　英文名稱(chēng)Butylparaben　　　規格?。?00mg　　CAS:94-26-8　　進(jìn)口、國產(chǎn)

骨化二醇標準品　　　英文名稱(chēng)Calcifediol　　　規格?。?5mg　　CAS:63283-36-3　　進(jìn)口、國產(chǎn)

卡角林標準品　　　英文名稱(chēng)Cabergoline　　　規格?。?5mg　　CAS:8409-90-7　　進(jìn)口、國產(chǎn)

標準品　　　英文名稱(chēng)　　　規格?。?0mg　　CAS:　　進(jìn)口、國產(chǎn)

雜質(zhì)標準品　　　英文名稱(chēng)　　　規格?。?0mg　　CAS:　　進(jìn)口、國產(chǎn)

鈣三醇標準品　　　英文名稱(chēng)　　　規格?。?mg　　CAS:32222-06-3　　進(jìn)口、國產(chǎn)

溶液標準品　　　英文名稱(chēng)Calcitriol Solution　　　規格?。?ml　　CAS:32222-06-3　　進(jìn)口、國產(chǎn)

醋酸鈣標準品　　　英文名稱(chēng)Calcium Acetate (AS)　　　規格?。篻　　CAS:62-54-4　　進(jìn)口、國產(chǎn)

抗壞血酸鈣標準品　　　英文名稱(chēng)Calcium Ascorbate　　　規格?。?00mg　　CAS:5743-28-2　　進(jìn)口、國產(chǎn)

碳酸鈣標準品　　　英文名稱(chēng)Calcium Carbonate (AS)　　　規格?。篻　　CAS:47-34-　　進(jìn)口、國產(chǎn)

氯化鈣標準品　　　英文名稱(chēng)Calcium Chloride (AS)　　　規格?。篻　　CAS:0035-04-8　　進(jìn)口、國產(chǎn)

注意事項：
. 接收到大鼠腦靜脈血管組織提取物培養，肉眼觀(guān)察細胞培養基顏色，顯微鏡觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議收到時(shí)的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴格無(wú)菌操作，打開(kāi)細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶?jì)鹊呐囵B基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀(guān)察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。