大鼠角膜成纖維細胞培養

注意事項：
. 接收到大鼠角膜成纖維細胞培養，肉眼觀(guān)察細胞培養基顏色，顯微鏡觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議收到時(shí)的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴格無(wú)菌操作，打開(kāi)細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶?jì)鹊呐囵B基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀(guān)察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

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大鼠角膜成纖維細胞【RatEye:NormalCornealFibroblasts】
    大鼠角膜成纖維細胞培養 產(chǎn)品描述：大鼠角膜成纖維細胞是結締組織中常見(jiàn)的一種細胞，其功能是可在角膜創(chuàng )傷后修復組織。公司提供的大鼠角膜成纖維細胞，采用消化制備而來(lái)。細胞的培養采用公司產(chǎn)品大鼠角膜成纖維細胞培養試劑盒(RatEyePrimaCell™：NormalCornealFibroblastsCatNo.3-7505)來(lái)優(yōu)化目的細胞生長(cháng)條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，大鼠角膜成纖維細胞傳0代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶(hù)可根據自身科研項目的需要選擇不同類(lèi)型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右*培養基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項；3、公司售后服務(wù)標準。
      保存和應用：客戶(hù)可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶(hù)收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進(jìn)行后續的實(shí)驗操作。如是凍存細胞，客戶(hù)收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。?

異常畢赤酵母 Pichia anomala球擬圓酵母 Torulopsis globosa

家貓肺成纖維樣細胞小鼠腺腫瘤細胞

小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞（EGFP標記）大鼠成骨細胞*培養基

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

HLF-a(人肺細胞)MADB06(大鼠腺細胞)

瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

刺孢吸水鏈霉菌 Streptomyces hygrospinosus佛羅里達側耳 Pleurotus florida

大鼠腎細胞小鼠肥大細胞細胞

檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum人小腦顆粒細胞*培養基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

大鼠角膜成纖維細胞培養4,4'-二分子式：68.28英文名稱(chēng)：4,4'- two piperidine：5336-72-8分子量： C0H20N2

-(3-丙)咪唑分子式：25.7英文名稱(chēng)： -（3 -丙）咪唑：5036-48-6分子量： C6HN3

雙(2-甲-3-呋喃)二分子式：226.3英文名稱(chēng)：Bis (2- -3-) two：28588-75-2分子量： C0H0O2S2

5-氟硝分子式：23.06英文名稱(chēng)：5- f：880-78-4分子量： C6F5NO2

2-氯-5-甲氧并咪唑分子式：82.6英文名稱(chēng)：2- chloro -5- methoxy benzimidazole：5965-54-5分子量： C8H7ClN2O

3,4-二氯甲分子式：6.03英文名稱(chēng)：3,4- two：95-75-0分子量： C7H6Cl2

漢英文名稱(chēng)：Chinese baicalin分子式：460.4分子量： C22H20O：5059-44-0

性嫩黃G英文名稱(chēng)：Acid yellow G分子式：380.35分子量： C6H3N4NaO4S：6359-82-6

6--2-硫脲嘧分子式：43.7英文名稱(chēng)：6- amino -2-：004-40-6分子量： C4H5N3OS

蕓香柚皮苷英文名稱(chēng)：Yun grapefruit peel glucoside分子式：580.535分子量： C27H32O4：4259-46-2

培養步驟：
大鼠角膜成纖維細胞培養對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。