大鼠食管平滑肌細胞培養

注意事項：
. 接收到大鼠食管平滑肌細胞培養，肉眼觀(guān)察細胞培養基顏色，顯微鏡觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議收到時(shí)的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴格無(wú)菌操作，打開(kāi)細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶?jì)鹊呐囵B基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀(guān)察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

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大鼠食管平滑肌細胞【RatEsophageal:NormalEsophagealSmoothMuscleCells】
    大鼠食管平滑肌細胞培養 產(chǎn)品描述：平滑肌的主要功能是負責空腔臟器的收縮，如血管、胃腸道、膀胱以及子宮等器官。它的結構與骨骼肌有很大的不同。食管壁包括三層，外縱形和內環(huán)形，中間肌層是黏膜層。食管的蠕動(dòng)是由平滑肌收縮嚴格控制。平滑肌的收縮可能是通過(guò)兩條不同的途徑激活磷脂酶（增加細胞內Ca2+濃度和激活G蛋白）并激活PKC-epsilon依賴(lài)的信號通路。公司提供的大鼠食管平滑肌細胞，均來(lái)自新鮮組織。細胞的培養采用公司產(chǎn)品大鼠食管平滑肌細胞培養試劑盒(RatEsophagealPrimaCell™:NormalEsophagealSmoothMuscleCellsCatNo.3-748)來(lái)優(yōu)化目的細胞生長(cháng)條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，大鼠食管平滑肌細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶(hù)可根據自身科研項目的需要選擇不同類(lèi)型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右*培養基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項；3、公司售后服務(wù)標準。
      保存和應用：客戶(hù)可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶(hù)收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進(jìn)行后續的實(shí)驗操作。如是凍存細胞，客戶(hù)收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。?

無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuum爪哇根霉 Rhizopus javanicus

小鼠肝細胞大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞*培養基C2C2(小鼠成肌細胞)

厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia假單胞菌 Pseudomonas sp.

HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞

粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

香菇 Lentinula edodes密蘇里游動(dòng)放線(xiàn)菌 Actinoplanes missourieneis

人直腸粘膜上皮細胞*培養基異常漢遜酵母 Hansenula anomala

人直結腸平滑肌細胞*培養基大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeSH-SY5Y(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)

大鼠食管平滑肌細胞培養四硼酸鉀分子式：305.5英文名稱(chēng)：Four boric acid：2045-78-2分子量： K2B4O7·4H2O

5-溴-2-氯-4-(三氟甲)吡分子式：260.4英文名稱(chēng)：5- -2- -4- (three f) pyridine：82322-93-8分子量： C6H2BrClF3N

,3,5-三氯分子式：8.45英文名稱(chēng)：,3,5- three：08-70-3分子量： C6H3Cl3

異惡唑草酮英文名稱(chēng)：Isoxazole clomazone分子式：359.32分子量： C5H2F3NO4S：42-29-0

4-二甲--新戊氯吡鎓分子式：228.76英文名稱(chēng)：4- two -- dimethylamino neopentyl pyridinium chloride：099-77-5分子量： C2H2ClN2

2-(2-羥-3,5-二特戊)駢三唑分子式：35.49英文名稱(chēng)：2- (2- hydroxy -3,5- two TERT amyl phenyl) benzo triazole three：25973-55-分子量： C22H29N3O

鹽甲氯芬酯英文名稱(chēng)：Hydrochloric acid methyl ester hydrochloride分子式：分子量： C2H6ClNO3. HCl：3685-84-5

開(kāi)環(huán)異落葉松樹(shù)脂酚英文名稱(chēng)：Open ring of Larch分子式：362.42分子量：C20H26O6：29388-59-8

分散黃23英文名稱(chēng)：Disperse yellow 23分子式：302.32996分子量： C8H4N4O：6250-23-3

2-溴-6-氟吡分子式：75.99英文名稱(chēng)：2- bromide -6-：4400-07-2分子量： C5H3BrFN

培養步驟：
大鼠食管平滑肌細胞培養對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。