小鼠程序性死亡（PD-）酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規格

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產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規格
英文名稱(chēng)： PD- ELISA Kit
規格：96T/48T
存儲條件：2-8℃
有效期：6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時(shí)檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應。
檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗，禁用于臨床 。

小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規格類(lèi)型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑：
①固相的抗原或抗體，
②酶標記的抗原或抗體，
③酶作用的底物。根據試劑的來(lái)源和標本的性狀以及檢測的具備條件，可設計出各種不同類(lèi)型的檢測方法。
（一）雙抗體夾心法、
（二）一步法、
（三）間接法測抗體、
（四）競爭法。
小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規格標本要求
．標本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻進(jìn)行，提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
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2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。
. 測定：以空白空調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后5分鐘以?xún)冗M(jìn)行。
小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對照孔及陽(yáng)性對照孔)。
3、加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀(guān)察結果：反應孔內顏色越深，陽(yáng)性程度越強，陰性反應為無(wú)色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.倍，即為陽(yáng)性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml， 每孔加0.ml，4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對照)
3、加酶標抗體：于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀(guān)察結果：反應孔內顏色越深，陽(yáng)性程度越強，陰性反應為無(wú)色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.倍，即為陽(yáng)性。

甲乙    分子式：    06.4    分子量：    C3H6O2S    英文名稱(chēng)：    Methylvinylmethyl    ：    3680/2/2
甲乙砜    分子式：    08.6    分子量：    C3H8O2S    英文名稱(chēng)：    Methylethylketone    ：    594-43-4
甲紫    英文名稱(chēng)：    Methylviolet    ：    8004-87-3    分子式：    407.99    分子量：    C25H30ClN3
鉀    分子式：    38.55    分子量：    KClO4    英文名稱(chēng)：    Potassiumperchlorate    ：    7778-74-7
假荊芥屬苷    英文名稱(chēng)：    Nepetaglycoside    ：    569-90-4    分子式：    478    分子量：    C22H22O2
間碘三氟甲    分子式：    272.0    分子量：    C7H4F3I    英文名稱(chēng)：    Iodinethreefluorinetoluene    ：    40-8-0
間碘三氟甲氧    分子式：    288.0    分子量：    C7H4F3IO    英文名稱(chēng)：    Iodinethreefluorinemethylgroup    ：    98206-33-6
間二(三氟甲)    分子式：    24.    分子量：    C8H4F6    英文名稱(chēng)：    Betweentwo(threef)benzene    ：    402-3-3
間二酚    英文名稱(chēng)：    Resorcinol    ：    08-46-3    分子式：    0.    分子量：    C6H6O2；C6H4-,3-(OH)
間二酚藍    英文名稱(chēng)：    Resorcinblue    ：    7939-2-3    分子式：    429.39    分子量：    C24H5NO7
間二甲    分子式：    06.6    分子量：    C8H0；C6H4(CH3)2    英文名稱(chēng)：    Metaxylene    ：    08-38-3DNA 上樣液 ( 紅 ),6×( 非甘油 )    0mL    
DNA 電泳分子量標準 (2)（300-5000 bp）    50 次    
McCoy's5A 培養基 ( 含 % 雙抗 )    500mL    
Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)    20μL    
氯化血紅素    g    
L-Glutathione (reduced form)( 抗氧化劑 )    g    
DNA 洗脫液    50mL    
尿酸酶    00U    
肝細胞生長(cháng)因子    5mL    
BamHI    2000U    
小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規格一管式點(diǎn)突變試劑盒    0 次    
8004-50    一站式柱式 miRNAout    50 次
XL0-Gold 感受態(tài)細胞    0. mL×0    
PCR 抑制物清除劑    mL    
23-0040-20    Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)    20μL
3276-250    Baker 甲醛鈣中性固定液    250 mL
328F-00    動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 6    00 次
6040-250    RNase-free 75% 乙醇    250mL